一、基本信息

产品编号：28704/28706

核心特点：快速、高效、室温稳定

产品描述：本试剂盒基于硅胶膜离心柱技术，专为从琼脂糖凝胶中高效回收纯化70 bp至10 kb范围内的DNA片段而设计，最大纯化量为10 μg。操作流程快速，无需酚氯仿抽提，且所有组分可在室温下稳定储存。

二、产品应用

本产品适用于从琼脂糖凝胶中纯化DNA片段，以及PCR产物的纯化。

△核酸纯化：从琼脂糖凝胶中回收特定大小的DNA条带。

△PCR产物纯化：去除PCR反应体系中的引物、dNTPs、酶及盐离子等杂质。

△DNA片段回收：为后续的克隆、测序、标记、连接等分子生物学实验提供高纯度DNA模板。

三、产品优势

✅高效结合：在优化的缓冲液条件下，DNA可高效、特异性地结合至硅胶膜，杂质被有效去除。

✅快速流程：从凝胶溶解到DNA洗脱，整个纯化过程可在约20-30分钟内完成。

✅广泛兼容：纯化的DNA适用于测序、酶切、连接、转化、体外转录等多种下游应用。

✅室温稳定：所有缓冲液及离心柱可在15-25°C室温条件下储存，方便使用与运输。

四、使用说明（实验流程概要）

1. 凝胶切除：使用洁净刀片从琼脂糖凝胶中切下含目标DNA的凝胶块。

2. 凝胶称重与溶解：称量凝胶重量，按比例加入Buffer QG，于50°C孵育直至凝胶完全溶解。

3. 溶液调节：确认溶解液为黄色，若为橙色或紫色，需加入醋酸钠溶液调节pH至结合范围。

4. 结合准备：向溶解液中加入异丙醇，混匀。

5. DNA结合：将混合液转移至QIAquick离心柱，离心使DNA结合至膜上，弃去滤液。

6. （可选）二次清洗：若DNA用于高敏感应用，可增加一次Buffer QG清洗步骤。

7. 膜清洗：加入Buffer PE清洗离心柱，离心去除残留乙醇与盐分。

8. 残留去除：空离离心柱1分钟以彻底去除残留洗涤液。

9. DNA洗脱：将离心柱置于新收集管中，加入洗脱缓冲液，静置后离心回收纯化DNA。

10. （可选）上样准备：若需电泳检测，可将纯化DNA与上样缓冲液混合后上样。

五、注意事项

1. 结合pH：Buffer QG的颜色指示pH，确保溶解后溶液为黄色（pH ≤ 7.5）是DNA高效结合的关键。

2. 乙醇添加：使用前必须按瓶签指示向Buffer PE中加入指定体积的乙醇，否则会影响洗涤效果。

3. 凝胶浓度：对于琼脂糖浓度高于2%的凝胶，需加倍加入Buffer QG以确保充分溶解。

4. 盐敏感应用：若纯化DNA用于测序或平末端连接等盐敏感实验，建议在Buffer PE洗涤后静置2-5分钟，并确保后续空离步骤彻底。

5. 洗脱优化：使用较小体积洗脱缓冲液（如30μl）并适当延长膜上静置时间（1-4分钟），可提高最终DNA产物的浓度。

六、相关产品推荐

1. QIAquick PCR Purification Kit (货号：28104/28106)：用于快速纯化PCR、酶切等反应后的DNA，去除引物、盐分及小片段杂质。

2. QIAprep Spin Miniprep Kit (货号：27104/27106)：用于从1-5 ml细菌培养液中快速小量抽提质粒DNA。

3. DNeasy Blood & Tissue Kit (货号：69504/69506)：用于从各种动物组织、血液、细胞及体液样本中纯化基因组DNA。

4. RNeasy Mini Kit (货号：74104/74106)：用于从动物细胞、组织及酵母中纯化高质量的总RNA。