一、基本信息

产品编号：12143

核心特点：超纯、转染级、高产量、专利树脂

产品描述：本系列试剂盒基于改良的碱裂解法和专利的QIAGEN树脂纯化技术，专为从细菌培养物中高效制备超纯、高产量且适用于转染等下游应用的超螺旋质粒DNA而设计。产品提供从微量到宏量（Mini, Midi, Maxi, Mega, Giga）的不同规格，以满足不同规模的实验需求。

二、产品应用

本系列试剂盒纯化的超纯质粒DNA适用于多种分子生物学应用。

△转染：纯化的DNA可直接用于哺乳动物细胞的转染实验。

△体外转录与翻译：为体外转录和翻译系统提供高质量的DNA模板。

△酶学修饰：适用于限制性内切酶消化、连接、测序等酶学操作。

△低拷贝质粒/粘粒纯化：特定规格（如QIAGEN-tip）可有效纯化低拷贝数载体。

三、产品优势

✅高纯度：采用专利树脂选择性结合与洗涤步骤，有效去除RNA、蛋白质、基因组DNA及内毒素等杂质，获得超纯DNA。

✅高产量：优化的结合与洗脱条件，确保从不同培养规模中均能获得高回收率的质粒DNA。

✅适用性广：纯化的DNA质量满足转染、体外转录、酶学反应等多种严苛下游应用的要求。

✅操作便捷：流程标准化，步骤精简，配备详细说明书与疑难解答指南，便于快速上手。

✅批次稳定：每批产品均经过严格质控测试，确保性能与质量的稳定性和可重复性。

四、使用说明（实验流程概要）

1. 细菌收获与重悬：离心收集细菌沉淀，使用Buffer P1（含RNase A）充分重悬菌体。

2. 碱裂解：加入Buffer P2进行裂解，温和混匀以使细胞完全裂解并变性染色体DNA与蛋白质。

3. 中和：加入预冷的Buffer P3中和裂解液，形成沉淀复合物，随后离心去除。

4. 结合：将含有质粒DNA的上清液转移至QIAGEN树脂柱，使DNA在特定盐浓度下结合至树脂。

5. 洗涤：使用中等盐浓度的Buffer QC洗涤树脂，去除残留的杂质。

6. 洗脱：使用低盐Buffer QF或TE缓冲液将高纯度的质粒DNA从树脂上洗脱下来。

7. 沉淀与溶解：通过异丙醇沉淀浓缩洗脱的DNA，经70%乙醇洗涤后，溶解于适当缓冲液中。

五、注意事项

1. 储存条件：未添加RNase A的Buffer P1可室温储存；添加RNase A后须于2-8°C保存，并在6个月内使用。QIAGEN树脂柱应干燥室温保存。

2. 操作安全：实验过程中需穿戴实验服、一次性手套及防护眼镜，并参照产品安全数据表（SDS）进行操作。

3. 试剂准备：部分试剂（如异丙醇、70%乙醇、重悬缓冲液）及细菌培养相关设备需用户自备。

4. 规范遵循：本产品用于分子生物学研究，操作应遵循相关生物安全指南（如NIH重组DNA指南）。

5. 流程优化：对于低拷贝质粒，建议参考手册中针对QIAGEN-tip的专门流程，并确保菌体量充足。

六、相关产品推荐

1. QIAGEN Plasmid Plus Kits（货号：12943 / 12963等）：在标准纯化基础上增加去内毒素步骤，为对内毒素敏感的细胞转染提供更优选择。

2. QIAGEN EndoFree Plasmid Kits（货号：12362 / 12391等）：专门设计用于去除内毒素，制备适用于体内转染或对内毒素极度敏感细胞的超纯质粒DNA。

3. QIAGEN HiSpeed Plasmid Kits（货号：12643 / 12663等）：采用高速离心方案，极大缩短纯化时间，适用于高通量或快速质粒DNA制备。

4. QIAGEN Plasmid Purification Buffers（货号：19051等）：提供试剂盒中关键缓冲液的单独包装，便于大规模实验或补充试剂消耗。