一、基本信息

产品名称：Thermo Scientific TranscriptAid T7 高产转录试剂盒

产品货号：K0441

规格：50次反应

保存温度：-20°C

二、产品介绍

TranscriptAid T7 高产转录试剂盒是一种基于T7 RNA聚合酶启动子系统的体外转录试剂盒，旨在从线性化DNA模板高效合成大量RNA。该试剂盒经过优化，采用Tris缓冲的核苷酸，显著提升了转录效率，尤其适用于短片段RNA的合成。

三、产品应用

本试剂盒适用于多种需要高产量、高质量RNA的分子生物学研究。

△体外翻译：为无细胞蛋白合成系统提供大量mRNA模板。

△反义RNA与RNAi研究：合成用于基因功能研究的反义RNA或RNA干扰分子。

△RNase保护分析：制备高比活性的非标记或标记RNA探针。

△RNA剪接研究：提供用于体外剪接分析的前体mRNA。

△RNA结合蛋白分离：合成用于蛋白-RNA互作研究的RNA配体。

△核酸杂交：制备用于Northern印迹、微阵列或原位杂交的非放射性标记探针。

四、产品优势

✅高产率：单次20μL反应可从1μg模板中产生约150μg RNA，产量可达传统方法的10倍。

✅可扩展性：反应体系可按比例放大，能够实现毫克级别的全长RNA制备。

✅高效优化：采用新型Tris缓冲NTPs，优化反应条件，尤其提高了短RNA片段（<200 nt）的合成效率。

✅应用广泛：试剂盒组分齐全，适用于从基础转录到探针标记等多种RNA相关实验。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 模板准备：使用线性化且含有T7启动子的纯化DNA作为转录模板。

2. 反应体系配置：在冰上混合试剂盒提供的酶混合物、反应缓冲液、NTPs与模板DNA。

3. 温育转录：将反应体系置于37°C孵育2小时，以进行RNA合成。

4. DNA模板消化：加入无RNase的DNase I以去除DNA模板，防止后续干扰。

5. RNA纯化：通过酚氯仿抽提或使用纯化柱对转录产物进行纯化与浓缩。

6. 产物评估：使用琼脂糖凝胶电泳或生物分析仪对RNA的产量、完整性及大小进行鉴定。

六、注意事项

1. 无RNase操作：实验全过程需使用无RNase的耗材与试剂，并严格遵守无菌操作规范，防止RNA降解。

2. 模板质量：确保DNA模板完全线性化且纯度高，残留的乙醇或盐分可能抑制转录反应。

3. 产物保存：纯化后的RNA建议分装保存于-70°C至-80°C，避免反复冻融以维持稳定性。

4. 浓度测定：使用紫外分光光度法测定RNA浓度时，需注意可能存在的盐或溶剂干扰，建议通过凝胶电泳辅助评估。

七、相关产品推荐

1. DNase I，无 RNase (1 U/μL) (货号：EN0521)

2. RiboRuler High Range RNA Ladder (货号：SM1821)

3. TRIzol Reagent (货号：15596026CN)

4. 无核酸酶水（未经 DEPC 处理）(货号：AM9937)