一、基本信息
产品名称:RetroNectin 重组人纤连蛋白片段
产品货号:T100A
规格:0.5 mg
保存温度:-20℃
二、产品介绍
RetroNectin是一种重组人纤连蛋白片段(rFN-CH-296),包含细胞结合结构域、肝素结合结构域和CS-1序列。该产品通过促进病毒颗粒与靶细胞在基质上的共定位,有效增强逆转录病毒介导的基因转导效率,广泛应用于基因治疗和细胞工程研究。
三、产品应用
RetroNectin试剂主要用于增强逆转录病毒介导的基因转导。
△逆转录病毒基因转导:通过RetroNectin包被板,利用RBV或SN方法提高对表达VLA-4/VLA-5整合素受体的靶细胞的转导效率。
△造血干细胞研究:优化CD34+等造血干/祖细胞的基因修饰实验。
△T淋巴细胞转导:用于高效转导正常或腺苷脱氨酶缺陷型T淋巴细胞。
△病毒载体生产辅助:作为包被基质,用于制备高滴度、高感染性的逆转录病毒或慢病毒载体。
四、产品优势
✅高效:通过空间共定位机制,显著提高病毒对靶细胞的感染效率。
✅稳定:重组蛋白片段,批次间一致性高,提供可靠的实验重复性。
✅灵活:提供RetroNectin结合病毒(RBV)和上清液(SN)两种转导方案,适应不同实验需求。
✅优化:RBV法可去除病毒上清中的抑制因子,进一步提升转导效率。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 包被:用无菌PBS将RetroNectin稀释至20-100 μg/ml,加入培养板,室温孵育2小时或4℃过夜。
2. 封闭:弃去包被液,加入2% BSA/PBS溶液进行封闭,室温静置30分钟。
3. 洗涤:弃去封闭液,用HBSS/Hepes或PBS洗涤板一次,备用。
4. 病毒结合(RBV法):将病毒上清加入RetroNectin包被板,32℃或37℃孵育4-6小时,或通过离心(32℃,1000-2000g,2小时)促进结合。
5. 细胞接种:弃去病毒上清并洗涤后,立即将重悬于生长培养基的靶细胞以推荐密度接种至板中。
6. 培养与收集:将细胞置于37℃、5% CO2培养箱中培养2-3天,收集悬浮和贴壁细胞。
六、注意事项
1. 储存:溶液需保存于-20℃,可反复冻融最多10次,避免剧烈震荡或涡旋。
2. 包被:包被后的板可在4℃密封保存一周,使用前需恢复至室温。
3. 操作:在病毒结合或细胞接种步骤中,需确保板底不干燥,以免影响蛋白活性和细胞状态。
4. 无菌:所有操作需在无菌环境下进行,使用无菌试剂和耗材,避免污染。
七、相关产品推荐
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