一、基本信息

产品名称：1-5TM I-5™ 2X High-Fidelity Master Mix

产品货号：I5HM-100 / I5HM-200 / I5HM-5000 / I5HM-25k

规格：100 reactions (50 ul vol), 2 x 1.25mL / 500 reactions (50 ul vol), 12.5 mL /  5,000 reactions (50 ul vol) /  25,000 reactions (50 ul vol)

保存温度：-20°C

二、产品介绍

1-5TM I-5™ 2X High-Fidelity Master Mix是一款预混的PCR反应体系，其核心成分为具有超高保真度和高延伸能力的1-5TM高保真DNA聚合酶。该预混液经过优化，可在室温下配置反应，仅需加入引物和DNA模板即可进行高效、精准的核酸扩增，适用于对扩增准确性要求严苛的各类分子生物学应用。

三、产品应用

本产品适用于多种需要高保真DNA扩增的实验场景。

△高特异性PCR：用于要求极高扩增特异性的PCR反应。

△高通量PCR：适用于大规模、自动化的PCR筛选与检测。

△克隆技术：为各类分子克隆实验（如载体构建）提供高质量的DNA片段。

△复杂模板扩增：适用于GC含量高、二级结构复杂或长度较长的困难模板的扩增。

四、产品优势

✅超高保真性：整合的1-5TM高保真DNA聚合酶具有极低的错配率，确保DNA复制的高度准确性。

✅卓越稳健性：优化的缓冲体系赋予聚合酶强大的延伸能力和反应耐受性，应对复杂模板表现优异。

✅操作便捷性：2X预混液形式简化了实验流程，支持室温操作，仅需添加模板和引物，减少人为误差。

✅应用灵活性：兼容三步法和两步法PCR程序，可根据引物Tm值灵活选择最佳扩增条件。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 体系配制：在冰上或室温下，按推荐比例将预混液、引物、模板DNA和无核酸酶水混合，配制反应体系。

2. PCR循环：将反应管置于热循环仪中，根据引物Tm值选择三步法或两步法程序（当引物Tm>68°C时推荐两步法）进行扩增。

3. 产物分析：扩增程序结束后，取出反应产物，通过琼脂糖凝胶电泳等方法对扩增片段进行验证与分析。

六、注意事项

1. 保存条件：产品需长期保存于-20°C，避免反复冻融以维持酶活性。

2. 模板用量：请根据模板类型（基因组DNA、质粒DNA或病毒DNA）使用推荐范围内的起始量。

3. 镁离子浓度：1X工作液中Mg²⁺终浓度为2 mM，必要时可以0.5 mM为增量进行优化，建议终浓度范围2-4 mM。

4. 克隆策略：本产品产生平末端PCR产物，推荐直接进行平末端连接克隆。若需进行TA克隆，需先纯化产物再进行加A尾处理。

七、相关产品推荐

1. I-5™ Hi-Fi HotStart DNA Polymerase（货号：I5HD-100 / I5HD-200）

2. Pfu DNA Polymerase（货号：AD-200）

3. HoTaq™ DNA Polymerase（货号：HT-200）

4. BL21 Competent E. coli（货号：BL21-100）