一、基本信息
产品名称:牛胰腺脱氧核糖核酸酶I
产品货号:D4527
规格:冻干粉
保存温度:-20°C
二、产品介绍
本品为源自牛胰腺的脱氧核糖核酸酶I(DNase I),经色谱纯化,以冻干粉形式提供。该酶是一种内切核酸酶,可水解单链DNA、双链DNA及染色质中的磷酸二酯键,产生带有5‘-磷酸末端的寡核苷酸或多核苷酸片段。其比活力≥2000 Kunitz单位/毫克蛋白,适用于多种分子生物学实验。
三、产品应用
本品(DNase I)广泛应用于分子生物学研究中,用于处理样品中的DNA。
△DNA去除:从蛋白质或RNA样品中去除DNA污染。
△缺口平移:在DNA上制造缺口,作为后续掺入标记核苷酸的第一步。
△染色质研究:用于研究染色质结构与功能。
△分子克隆:在特定实验步骤中处理DNA样品。
四、产品优势
✅高纯度:经色谱纯化,主要杂质如蛋白酶、RNase及胰凝乳蛋白酶含量均控制在极低水平。
✅高比活:比活力≥2000 Kunitz单位/毫克蛋白,酶学活性有保障。
✅严格质控:通过比色法测定蛋白含量≥80%,产品质量稳定可靠。
✅来源可靠:源自牛胰腺,为经典且研究充分的酶来源。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 复溶:使用0.15 M NaCl溶液将冻干粉溶解至推荐浓度(如5 mg/mL)。
2. 配制反应体系:在含有适量二价阳离子(如Mg²⁺或Mn²⁺)的适宜缓冲液(pH 7-8为佳)中建立反应体系。
3. 孵育反应:将酶加入含有底物DNA的反应体系中,在适宜温度(如25-37°C)下孵育。
4. 终止反应:通过加热(如68°C,10分钟)或加入EDTA等螯合剂终止酶反应。
5. 纯化与分析:根据后续实验需求,对反应产物进行纯化或直接进行分析。
六、注意事项
1. 储存条件:长期保存需置于-20°C;复溶后的溶液建议分装并于-20°C保存,短期内使用可置于2-8°C。
2. 活性依赖:酶活性绝对依赖二价金属阳离子(如Mg²⁺、Mn²⁺),反应体系中需确保其存在。
3. 抑制剂:注意避免使用EDTA、EGTA、SDS、肌动蛋白及柠檬酸盐(针对Mg²⁺激活的酶活)等抑制剂。
4. 热稳定性:该酶在68°C下迅速失活,可利用此特性终止反应;但在pH 5-7条件下,于60°C内可保持数小时活性。
5. 用途限定:本品仅限用于研发,不适用于药物、家庭或其他用途。
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