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Sigma 牛胰腺脱氧核糖核酸酶I

货号:D4527

牛胰腺脱氧核糖核酸酶I(DNase I)是一种高纯度色谱纯化酶,具有≥2000 Kunitz单位/毫克蛋白的高比活力,适用于分子生物学实验中的DNA处理。本品以冻干粉形式提供,确保稳定性和可靠性,是研究染色质结构与功能、DNA去除和分子克隆的理想选择。

一、基本信息

产品名称:牛胰腺脱氧核糖核酸酶I

产品货号:D4527

规格:冻干粉

保存温度:-20°C

二、产品介绍

本品为源自牛胰腺的脱氧核糖核酸酶I(DNase I),经色谱纯化,以冻干粉形式提供。该酶是一种内切核酸酶,可水解单链DNA、双链DNA及染色质中的磷酸二酯键,产生带有5‘-磷酸末端的寡核苷酸或多核苷酸片段。其比活力≥2000 Kunitz单位/毫克蛋白,适用于多种分子生物学实验。

三、产品应用

本品(DNase I)广泛应用于分子生物学研究中,用于处理样品中的DNA。

DNA去除:从蛋白质或RNA样品中去除DNA污染。

缺口平移:在DNA上制造缺口,作为后续掺入标记核苷酸的第一步。

染色质研究:用于研究染色质结构与功能。

分子克隆:在特定实验步骤中处理DNA样品。

四、产品优势

高纯度:经色谱纯化,主要杂质如蛋白酶、RNase及胰凝乳蛋白酶含量均控制在极低水平。

高比活:比活力≥2000 Kunitz单位/毫克蛋白,酶学活性有保障。

严格质控:通过比色法测定蛋白含量≥80%,产品质量稳定可靠。

来源可靠:源自牛胰腺,为经典且研究充分的酶来源。

五、使用说明(实验流程概要)

1. 复溶:使用0.15 M NaCl溶液将冻干粉溶解至推荐浓度(如5 mg/mL)。

2. 配制反应体系:在含有适量二价阳离子(如Mg²⁺或Mn²⁺)的适宜缓冲液(pH 7-8为佳)中建立反应体系。

3. 孵育反应:将酶加入含有底物DNA的反应体系中,在适宜温度(如25-37°C)下孵育。

4. 终止反应:通过加热(如68°C,10分钟)或加入EDTA等螯合剂终止酶反应。

5. 纯化与分析:根据后续实验需求,对反应产物进行纯化或直接进行分析。

六、注意事项

1. 储存条件:长期保存需置于-20°C;复溶后的溶液建议分装并于-20°C保存,短期内使用可置于2-8°C。

2. 活性依赖:酶活性绝对依赖二价金属阳离子(如Mg²⁺、Mn²⁺),反应体系中需确保其存在。

3. 抑制剂:注意避免使用EDTA、EGTA、SDS、肌动蛋白及柠檬酸盐(针对Mg²⁺激活的酶活)等抑制剂。

4. 热稳定性:该酶在68°C下迅速失活,可利用此特性终止反应;但在pH 5-7条件下,于60°C内可保持数小时活性。

5. 用途限定:本品仅限用于研发,不适用于药物、家庭或其他用途。

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