一、基本信息
产品名称:BeyoClick™ EdU-594细胞增殖检测试剂盒
产品货号:C0078S / C0078L
规格:50-500次 / 200-2000次
保存温度:-20℃避光保存
二、产品介绍
BeyoClick™ EdU-594细胞增殖检测试剂盒基于胸苷类似物EdU在DNA合成期的特异性掺入原理,通过铜催化的点击化学反应实现与AF594荧光染料的共价标记。该技术能够高灵敏度、特异地检测处于增殖状态的细胞,适用于培养细胞、组织切片等多种样本的定性与定量分析,其结果可通过荧光显微镜、流式细胞仪或高内涵成像系统进行观测。
三、产品应用
本BeyoClick™ EdU-594试剂盒主要用于细胞增殖研究,具体应用包括:
△细胞增殖动力学研究:观察和分析细胞群体的增殖速率与周期分布。
△药物筛选与药效评估:定量评估化疗药物、靶向药物或生长因子对细胞增殖的抑制或促进作用。
△肿瘤生物学研究:检测肿瘤细胞、干细胞或特定组织区域的增殖活性。
△组织再生与修复研究:在动物模型或组织切片中定位和量化新生细胞。
四、产品优势
✅高灵敏度:基于点击化学的标记策略,无需DNA变性即可实现高效、特异的信号放大,对单个增殖细胞检测灵敏度高。
✅操作便捷:相较于传统的BrdU检测法,省去了DNA变性及抗体孵育等复杂步骤,实验流程显著简化。
✅兼容性佳:优化的固定与通透步骤能较好保持细胞形态,兼容后续的免疫荧光染色或其它核染色。
✅快速高效:从EdU标记到荧光检测可在数小时内完成,适合中等通量的实验需求。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 样本准备:将细胞接种于多孔板中培养过夜,并进行所需的实验处理。
2. EdU标记:向细胞培养体系中加入终浓度为10μM的EdU工作液,孵育2小时。
3. 固定通透:移除培养基,使用固定液室温固定细胞15分钟,随后用通透液处理10-15分钟。
4. 点击反应:配制点击反应液,覆盖样品,室温避光孵育30分钟以标记掺入的EdU。
5. 洗涤:使用洗涤液充分洗涤细胞,以去除未反应的试剂。
6. 核复染:可选步骤,使用Hoechst 33342对细胞核进行染色,便于观察总细胞数。
7. 检测分析:在荧光显微镜下观察(Ex/Em ~590/617 nm),或制备成单细胞悬液进行流式细胞术分析。
六、注意事项
1. 组分保存:试剂盒中的Azide 594和Hoechst 33342对光敏感,必须避光保存与操作。
2. 溶液配制:Click Additive溶解后若出现沉淀,应充分混匀至完全溶解;若溶液变为棕色则表明失效,不可使用。
3. 催化体系:点击反应依赖于铜离子催化,需注意其对某些细胞结构的潜在影响,并确保反应液按顺序正确配制。
4. 实验对照:建议设置未经EdU标记的细胞样本作为阴性对照,以确保检测信号的特异性。
5. 安全规范:本产品仅供科研使用,操作时应穿戴适当的个人防护装备。
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