一、基本信息
产品名称:人抗双链DNA IgG ELISA检测试剂盒
产品货号:3100-HS
规格:96孔(12条8孔可拆条)
保存温度:2-8°C
二、产品介绍
本试剂盒是一种基于酶联免疫吸附法的高灵敏度检测试剂盒,专用于定量或滴定人血清、血浆等样本中特异性针对双链DNA的IgG抗体活性。其检测原理基于抗原-抗体的特异性结合与酶促显色反应,适用于系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病的研究与辅助诊断。
三、产品应用
本试剂盒主要用于检测样本中人抗dsDNA IgG抗体的活性。
△自身免疫研究:用于系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病的机制研究与抗体水平监测。
△临床辅助诊断:作为辅助工具,检测患者血清中抗dsDNA IgG抗体的水平。
△药物研发评估:用于评估生物制剂、免疫治疗药物或佐剂对自身抗体产生的影响。
△动物模型验证:适用于Faslpr突变小鼠等自身免疫疾病模型的研究。
四、产品优势
✅高特异性:采用纯化dsDNA包被微孔板,确保检测仅针对dsDNA特异性抗体,不与IgA、IgM或IgE发生交叉反应。
✅高灵敏度:通过优化dsDNA包被水平、HRP偶联物浓度及低背景样本稀释液,可在1:1000稀释的人血清中有效区分特异性信号与背景噪声。
✅低背景干扰:提供专用的低非特异性结合样本稀释液,能显著降低背景信号,提高阳性与阴性样本的区分度。
✅结果稳定:提供的抗DNA校准品可用于标准化实验过程,减少板间差异,确保结果的可比性与重复性。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 试剂准备:使用蒸馏水或去离子水按说明书要求稀释洗涤液浓缩液、样本稀释液浓缩液及HRP偶联物浓缩液。
2. 样本处理:将血清等样本在1X样本稀释液中进行初步稀释以稳定抗体活性,随后可根据实验设计使用低背景稀释液进行进一步稀释。
3. 加样孵育:将稀释后的样本、校准品及稀释液空白分别加入dsDNA包被的微孔中,于适宜温度下孵育,使抗体与固相抗原结合。
4. 洗涤:弃去孔内液体,使用1X洗涤液充分洗涤微孔,去除未结合物质。
5. 酶标抗体孵育:加入新鲜稀释的HRP标记的抗人IgG抗体,孵育后再次洗涤。
6. 显色反应:加入TMB底物溶液,避光孵育,HRP催化底物产生蓝色产物。
7. 终止与读数:加入终止液终止反应,溶液变黄,使用酶标仪在450 nm波长下测量各孔吸光度值。
8. 数据分析:根据校准品曲线计算样本中抗dsDNA IgG抗体的相对活性单位。
六、注意事项
1. 安全防护:部分试剂含有溴硝基二氧烷(BND)或稀硫酸,操作时应遵循良好实验室规范,避免皮肤接触或吸入,建议在通风橱内操作。
2. 试剂储存:未开封试剂盒于2-8°C保存至有效期。工作液需按说明书要求现用现配,HRP偶联物工作液需当日使用并丢弃。
3. 样本一致性:所有待比较样本必须使用同一种稀释液(低背景稀释液或1X样本稀释液)进行稀释,以确保结果可比性。
4. 稀释度选择:需根据预期抗体效价优化样本稀释度,对于正常人血清,通常需稀释至1:1000或更高倍数,以使非免疫样本的净信号低于0.5 OD。
5. 对照设置:每次实验必须设置稀释液空白孔与校准品孔,以监控实验性能并进行结果标准化。空白孔OD值应低于0.3。
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