一、基本信息
产品名称:Neutrophil Isolation Kit, mouse
产品货号:130-097-658
规格:for 1×109 total cells
保存温度:避光保存于2–8°C,请勿冷冻
二、产品介绍
本试剂盒基于MACS®磁珠分选技术,通过负选法高效分离小鼠中性粒细胞。其原理是利用生物素化抗体混合物标记非靶细胞,再通过结合抗生物素微珠进行磁化,最终在磁场中去除标记细胞,从而获得高纯度的未标记中性粒细胞。适用于从小鼠骨髓或外周血样本中进行细胞分选。
三、产品应用
本试剂盒用于分离小鼠中性粒细胞,适用于多种下游功能与应用研究。
△体外功能分析:用于研究中性粒细胞的吞噬功能、细胞因子表达调控或信号转导。
△分化研究:用于探索中性粒细胞的分化过程及相关机制。
△共培养实验:为与其他细胞的共培养体系提供高纯度的中性粒细胞。
△过继转移实验:为体内过继转移研究提供所需的中性粒细胞。
四、产品优势
✅高特异性:采用负选策略,避免抗体直接标记中性粒细胞,最大程度保持细胞活性和功能。
✅高纯度与得率:优化的抗体混合物与分选流程,结合推荐规格的MACS分选柱,可同时实现高纯度和高细胞回收率。
✅操作便捷:提供标准化的操作流程与明确的体积建议,简化实验步骤,确保结果可重复性。
✅灵活兼容:适用于从小鼠骨髓或外周血等多种起始样本中分离中性粒细胞。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 样本制备:制备单细胞悬液,对于外周血样本需先裂解红细胞,建议去除死细胞以减少非特异性结合。
2. 磁标记:将细胞重悬于缓冲液,依次加入生物素抗体混合物和抗生物素微珠,于2-8°C下分步孵育,每次孵育后需洗涤细胞。
3. 分选准备:根据总细胞数选择合适规格的MACS分选柱与分选器,并用缓冲液润洗分选柱。
4. 上样与收集:将标记后的细胞悬液上样至置于磁场中的分选柱,收集流穿液,即为富集的中性粒细胞。
5. 柱清洗:使用缓冲液多次清洗分选柱,收集所有流穿液并与首次收集液合并,以获得最大细胞得率。
六、注意事项
1. 保存条件:所有组分含0.05%叠氮钠,需严格避光于2-8°C保存,不可冷冻。
2. 安全警示:试剂含叠氮钠,在酸性条件下可能生成剧毒叠氮酸,废弃时应用大量水冲洗。
3. 缓冲液准备:需使用含EDTA和蛋白(如BSA)的冰冷缓冲液,使用前建议脱气以防止气泡阻塞分选柱。
4. 温度控制:整个磁标记过程需保持低温操作,使用预冷溶液,以防止抗体帽化及非特异性标记。
5. 细胞状态:上样前务必确保为单细胞悬液,建议使用30 µm滤膜过滤以去除细胞团块,防止堵塞分选柱。
6. 分选柱选择:为获得最佳效果,处理骨髓样本时强烈推荐使用LS分选柱,处理外周血样本时强烈推荐使用MS分选柱。
七、相关产品推荐
1. MACS® BSA Stock Solution(货号:130-091-376)
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