一、基本信息
产品名称:胶原酶/中性蛋白酶® (COLLDISP-RO)
产品货号:10269638001(100 mg)/ 11097113001(500 mg)
规格:100 mg / 500 mg
保存温度:2-8°C干燥保存
二、产品介绍
本品为罗氏(Roche)生产的胶原酶/中性蛋白酶®复合酶,呈冻干粉末形态,非无菌。该产品由来源于溶藻弧菌的胶原酶和来源于多粘芽孢杆菌的中性蛋白酶(Dispase)组成,两种酶协同作用,适用于温和、高效地消化细胞外基质,特别适合于从多种组织中分离制备完整活细胞。
三、产品应用
胶原酶/中性蛋白酶®主要用于组织解离以制备原代细胞。具体应用包括:
△组织解离:用于从皮肤、肝脏、肾脏等多种器官和组织中分离原代细胞。
△表皮分离:能够将表皮从真皮层完整、温和地分离。
△细胞传代:用于消化贴壁培养的上皮细胞,使其从培养基质上完整脱离。
△基底膜消化:可特异性裂解基底膜成分,有助于释放上皮细胞团。
四、产品优势
✅高效协同:胶原酶与中性蛋白酶协同作用,能更有效地消化胶原和细胞间连接蛋白,提高细胞得率。
✅温和消化:中性蛋白酶作用条件温和,有助于维持分离细胞的完整性和高活力。
✅特异性强:胶原酶特异性降解天然胶原蛋白,对细胞损伤小。
✅活性明确:产品酶活性经过严格标定,胶原酶活性>0.1 U/mg,中性蛋白酶活性>0.8 U/mg,批次间稳定性好。
✅低污染活性:非特异性蛋白水解活性低(<0.1 U/mg),减少了对目标蛋白或细胞的非必要降解。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 复溶:将冻干粉溶于无菌水,配制成100 mg/mL的浓缩储备液。
2. 稀释:使用不含Ca²⁺/Mg²⁺的磷酸盐缓冲液(PBS)将储备液稀释至1 mg/mL的工作浓度。
3. 过滤:使用0.22 μm无菌滤膜过滤工作液以去除潜在微生物污染。
4. 消化:将组织样本浸入工作液中,在37°C下进行消化,时间依组织类型而定。
5. 终止:消化完成后,加入含血清的培养基以终止酶反应。
6. 收集:通过过滤或离心收集游离细胞,进行后续培养或分析。
六、注意事项
1. 储存:冻干粉需于2-8°C干燥保存;复溶后的工作液建议分装并于-15至-25°C保存,避免反复冻融。
2. 无菌:本品为非无菌产品,配制工作液时需进行无菌过滤,所有操作应在无菌条件下进行。
3. 抑制剂:EDTA或EGTA可抑制酶活性;但血清不能抑制本品活性,终止反应需通过稀释或去除酶液实现。
4. 离子依赖:酶活性可能依赖于钙离子,配制及稀释时建议使用说明书推荐的缓冲体系。
5. 用途:本品仅限用于生命科学研究,不可用于临床诊断。