一、基本信息
产品名称:Opal Polaris 7-Color 免疫组化试剂盒
产品货号:NEL861001KT
规格:50张切片
保存温度:4°C避光保存
二、产品介绍
Opal Polaris 7-Color免疫组化试剂盒是一种基于酪胺信号放大(TSA)技术的多色荧光免疫组化检测系统。该试剂盒专为福尔马林固定石蜡包埋组织设计,通过微波处理实现抗体的有效剥离,从而可在同一张组织切片上顺序检测多达7种靶标蛋白,适用于组织微环境中多重生物标志物的空间共定位研究。
三、产品应用
Opal Polaris 7-Color手动免疫组化试剂盒主要用于多重荧光免疫组化实验。
△肿瘤免疫微环境分析:同时检测多种免疫细胞标志物(如CD3, CD8, CD68, PD-L1等)及肿瘤标志物。
△神经科学研究:对脑组织切片中多种神经元、胶质细胞及突触蛋白进行共定位分析。
△炎症与纤维化研究:在组织病理切片上多重标记不同细胞类型及细胞外基质成分。
△药物研发与生物标志物发现:评估药物对组织内多个靶点表达及空间分布的影响。
四、产品优势
✅高重数:可在单张切片上实现多达7种靶标的顺序标记与检测。
✅高信噪比:独特的微波处理步骤能有效去除抗体、淬灭内源性过氧化物酶并降低组织自发荧光。
✅无交叉反应:通过微波剥离彻底去除上一轮抗体,确保后续轮次标记的特异性。
✅宽光谱范围:提供从480 nm到780 nm的多种荧光染料,光谱分离效果好,兼容多光谱成像系统。
✅组织兼容性:优化的工作流程适用于FFPE组织切片,能有效应对固定带来的抗原遮蔽问题。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 切片准备:对FFPE组织切片进行脱蜡、水化及抗原修复。
2. 内源酶阻断:使用微波处理淬灭组织内源性过氧化物酶活性。
3. 非特异性封闭:应用封闭液阻断组织的非特异性结合位点。
4. 一抗孵育:滴加针对第一靶标的一抗工作液,于湿盒中孵育。
5. 二抗孵育:加入HRP标记的聚合物二抗。
6. 信号放大:应用Opal荧光染料工作液,在HRP催化下产生共价沉积的荧光信号。
7. 抗体剥离:通过微波处理剥离已结合的一抗和二抗复合物。
8. 重复标记:从步骤3开始重复流程,进行下一靶标的标记。
9. 核复染与封片:使用光谱DAPI进行细胞核复染,最后用抗淬灭封片剂封片。
六、注意事项
1. 安全防护:部分试剂含DMSO、Proc 300及DAPI,具有刺激性或危害性,操作时需佩戴手套、护目镜并在通风橱中进行。
2. 样品保湿:实验过程中切勿让切片干燥,以免导致非特异性背景升高或信号丢失。
3. 抗体优化:建议对所用的一抗及二抗进行预实验滴定,以确定在Opal体系中的最佳工作浓度。
4. 微波均一性:确保微波处理步骤均匀充分,以彻底淬灭内源性酶活并有效剥离抗体。
5. 成像参数:为获得最佳光谱拆分效果,建议将各荧光通道的曝光时间优化至10-30 counts范围内。
七、相关产品推荐
1. 1X Opal Anti-Ms + Rb HRP(货号:ARH1001EA)
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