一、基本信息

产品名称：TUNEL FITC细胞凋亡检测试剂盒

产品货号：A111-01 / A111-02 / A111-03

规格：20rxns / 50rxns / 100rxns

保存温度：-30℃至-15℃保存

二、产品介绍

本试剂盒基于末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记（TUNEL）技术，用于检测细胞凋亡过程中产生的DNA片段化。通过优化的标记反应体系，该试剂盒能够高效、特异地标记凋亡细胞DNA断裂产生的3‘-OH末端，并利用FITC荧光信号进行检测，适用于多种样本类型的凋亡水平分析。

三、产品应用

本产品适用于多种样本的细胞凋亡检测。

△石蜡组织切片：用于石蜡包埋组织样本的凋亡原位检测。

△冰冻组织切片：用于新鲜或速冻组织样本的凋亡检测。

△贴壁培养细胞：用于培养于玻片或培养皿中的贴壁细胞凋亡检测。

△悬浮培养细胞：用于悬浮生长细胞系的凋亡检测，适用于流式细胞术分析。

四、产品优势

✅高灵敏度：采用优化的核苷酸掺入比例，可在单个DNA断裂末端形成更长的标记序列，显著增强信号强度。

✅特异性强：特异性识别并标记凋亡过程中产生的DNA 3‘-OH末端，有效减少非特异性背景。

✅样本兼容性广：经过验证适用于石蜡切片、冰冻切片、贴壁细胞及悬浮细胞等多种样本类型。

✅操作便捷：提供完整的缓冲液和酶组分，用户只需自备少量常用试剂即可完成实验。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 样本固定：使用4%多聚甲醛对细胞或组织切片进行固定。

2. 样本通透：使用适当浓度的Triton X-100溶液对固定后的样本进行透膜处理。

3. 平衡处理：使用试剂盒提供的Equilibration Buffer平衡样本，为标记反应做准备。

4. 标记反应：将TdT酶与FITC-12-dUTP Labeling Mix混合，滴加至样本上并于湿盒中避光孵育。

5. 终止与洗涤：使用终止缓冲液终止反应，并用PBS充分洗涤去除未结合的标记物。

6. 复染与封片：使用DAPI或PI进行细胞核复染，然后使用抗荧光淬灭封片剂封片。

7. 检测分析：在荧光显微镜下观察FITC绿色荧光信号，或使用流式细胞仪进行定量分析。

六、注意事项

1. 储存条件：核心酶与标记混合物必须严格在-30℃至-15℃条件下保存，标记混合物需避光，以防荧光淬灭。

2. 样本处理：组织切片脱蜡、水化及细胞固定、通透步骤需彻底，以确保试剂充分接触靶点。

3. 对照设置：每次实验必须设置阳性对照（如使用DNase I处理样本）和阴性对照（不加TdT酶），以验证实验体系的有效性。

4. 避光操作：所有涉及荧光标记物的步骤，包括孵育和保存，均需在避光条件下进行。

5. 适用范围：本产品仅限于科学研究用途，不可用于临床诊断或其他非科研目的。

七、相关产品推荐

1. TUNEL BrightGreen Apoptosis Detection Kit（货号：A112）

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4. Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit（货号：A211）