一、基本信息

产品名称：MycAaway™ Plus-Color一步法支原体检测试剂盒

产品货号：40612ES25 / 40612ES60

规格：25次检测/100次检测

保存温度：-20°C避光保存

二、产品介绍

本产品是基于等温扩增技术开发的一款用于快速检测细胞培养液中支原体污染的试剂盒。其通过特异性扩增支原体DNA保守序列，引起反应液颜色由蓝紫色变为天蓝色，实现肉眼判读结果，无需电泳。该试剂盒针对常见支原体种类设计，相较于传统PCR方法，在灵敏度、特异性及操作便捷性方面均有显著提升。

三、产品应用

本产品主要用于细胞培养过程中支原体污染的快速检测。

△细胞培养质控：用于常规细胞培养上清的支原体污染监测。

△细胞库筛查：用于细胞库建立或使用前的支原体污染排查。

△生物制品安全检测：用于疫苗、抗体等生物制品生产用细胞基质的支原体检测。

四、产品优势

✅高灵敏度：基于优化的等温扩增技术，对支原体DNA的检测下限低，灵敏度显著高于传统PCR方法。

✅高特异性：针对多种常见支原体（如M. orale, M. hyorhinis等）的保守序列设计，交叉反应风险低。

✅结果直观：扩增产物通过颜色变化（蓝紫→天蓝）指示，无需开盖及电泳，肉眼即可判读。

✅操作简便：采用一步法操作，仅需恒温孵育，简化了实验流程，缩短了检测时间。

✅稳定性好：优化后的反应体系在结果判读阶段具有较好的颜色稳定性，降低了假阳性风险。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 样本制备：对于贴壁细胞，直接吸取培养上清；对于悬浮细胞，经500g离心5分钟后取上清。建议在细胞换液培养3天以上、处于良好生长状态时取样。

2. 体系配制：将试剂盒核心组分（MycAway™ -Color Lamp 与 Primer）解冻并混匀后，按每反应19 μL的体积配制主混合液。

3. 加样分装：向反应管中分装19 μL主混合液，随后分别加入1 μL待测样本、阳性对照或无模板水（阴性对照）。

4. 反应孵育：将反应管于30°C静置5分钟，随后转移至63°C恒温设备（推荐使用PCR仪）中精确孵育60分钟。

5. 结果判读：反应结束后，于室温光线良好处以白纸为背景观察颜色。反应液呈蓝紫色判定为阴性，呈天蓝色判定为阳性。

六、注意事项

1. 操作环境：整个实验操作，包括试剂配制、样本处理及加样，建议在生物安全柜或超净工作台中进行，以防止气溶胶污染。

2. 温度控制：反应酶对温度敏感，需确保63°C孵育温度的准确性，推荐使用温控精确的PCR仪。使用水浴锅时需预热至设定温度。

3. 时间控制：63°C孵育时间应严格控制在60分钟，过度延长孵育时间可能导致非特异性扩增，影响结果判断。

4. 污染预防：反应结束后请勿开盖观察，以免环境中支原体DNA污染反应体系，造成假阳性结果。

5. 样本要求：检测样本为细胞培养上清，避免带入细胞碎片或过多培养基成分，以免抑制扩增反应。

6. 产品用途：本产品仅限于科学研究使用，不适用于临床诊断。

七、相关产品推荐

1. 支原体去除试剂（1000×）（货号：40607ES）

2. 支原体预防试剂（2000×）（货号：40608ES）

3. GMyc-PCR支原体检测试剂盒（货号：40601ES）

4. 细胞培养用青霉素-链霉素（双抗）（货号：60162ES）