一、基本信息
产品名称:Strep-Tactin®XT 4Flow® 树脂
产品货号:2-5010-002/2-5010-010/2-5010-025/2-5010-500
规格:2 mL树脂(含2 mL缓冲液);10 mL树脂(含10 mL缓冲液);25 mL树脂(含25 mL缓冲液);500 mL树脂(含500 mL缓冲液)
保存温度:2-8 °C
二、产品介绍
Strep-Tactin®XT 4Flow® 树脂是一种用于亲和层析的预装介质,其固相化有Streptavidin的优化变体Strep-Tactin®XT。该配体对带有Twin-Strep-tag®或Strep-tag®II的融合蛋白具有高亲和力和特异性,适用于在重力流层析柱中进行一步法蛋白纯化。
三、产品应用
本产品主要用于含有Twin-Strep-tag®或Strep-tag®II标签的融合蛋白的亲和纯化。
△重组蛋白纯化:从复杂样品(如细胞裂解液、培养上清)中快速、特异性地捕获并纯化目标融合蛋白。
△重力流层析:适用于手动或重力流层析柱操作,不推荐用于批次纯化。
四、产品优势
✅高亲和力:配体为经过优化的Strep-Tactin®XT,对Twin-Strep-tag®和Strep-tag®II标签具有高结合亲和力。
✅高载量:在标准测试条件下,对50 kDa的Twin-Strep-tag®融合蛋白的结合容量可达11 mg/mL树脂。
✅高特异性:能有效降低非特异性结合,获得高纯度的目标蛋白。
✅操作温和:可使用含生物素的缓冲液进行洗脱,条件温和,有助于保持蛋白活性。
✅即用型:以50%的预平衡悬浮液形式提供,可直接用于装柱。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 装柱:取适量50%树脂悬浮液(目标柱床体积的2倍)装入层析柱,使其自然沉降形成均匀柱床。
2. 平衡:取下重力流柱两端盖子,让储存液流尽。使用 2 倍柱体积(CV)的平衡缓冲液(1x Buffer W)平衡层析柱。
3. 上样:将含有目标融合蛋白的样品以重力流方式上样。
4. 洗涤:使用 5 倍柱体积的洗涤缓冲液(1x Buffer W)洗涤层析柱,去除未结合和非特异性结合的杂质。
5. 洗脱:使用洗脱缓冲液(1x Buffer BXT)进行洗脱,通常采用分步收集(如 6 x 0.5 CV)以获得高浓度蛋白组分。
6. 再生:纯化后,使用再生缓冲液(Buffer XT-R)彻底再生树脂,随后用平衡缓冲液洗涤并置于 2-8°C 或 20% 乙醇中保存。
六、注意事项
1. 储存:产品需在2-8°C条件下保存,切勿冷冻。
2. 装柱:本树脂专为柱层析优化,建议使用重力流或低压层析柱,不适用于批次纯化。
3. 载量:标称结合容量基于特定测试蛋白,实际载量可能因目标蛋白特性而异。
4. 缓冲液:产品含有0.02%叠氮钠作为防腐剂,操作时需遵守实验室安全规范。
5. 洗脱:建议使用配套的Buffer BXT进行洗脱以获得最佳效果。
6. 用途:本产品仅供研究使用。
七、相关产品推荐
1. Buffer BXT, 10x (货号:2-1042-025)
2. Buffer XT-R (货号:2-1045-250)