一、基本信息

产品编号：P0011/P0012/P0012S

规格：5000次，500次，200次

保存温度：室温保存。蛋白标准配制成溶液后-20℃冻存。

产品描述：本试剂盒基于双喹啉甲酸（BCA）法原理开发，用于精确测定溶液中蛋白质的浓度。其检测下限为25 µg/mL，最小检测蛋白量为0.5 µg，在50-2000 µg/mL浓度范围内线性关系良好。该检测方法对多种常见去垢剂具有良好耐受性，但受特定螯合剂和还原剂影响。每个试剂盒可完成约5000次基于微孔板的检测。

二、产品应用

本BCA蛋白浓度测定试剂盒广泛应用于生命科学研究中需要对蛋白质溶液进行准确定量的场景。

△蛋白质样品定量：适用于细胞裂解液、组织匀浆液、纯化蛋白溶液等多种样本的浓度测定。

△兼容性测试：可耐受样品中一定浓度的离子型（如SDS）与非离子型（如Triton X-100, Tween系列）去垢剂。

△下游应用前处理：为Western Blot、蛋白质纯化、酶活性测定等实验提供准确的蛋白浓度数据。

三、产品优势

✅高灵敏度：检测下限低至25 µg/mL，可准确测定微量蛋白样品。

✅广泛兼容性：对样品中高达5%的SDS、Triton X-100及Tween系列去垢剂具有良好的耐受性。

✅操作简便：基于96孔板的高通量操作流程，工作液配制简单，孵育后直接检测。

✅良好线性：在50-2000 µg/mL的浓度范围内，吸光度值与蛋白浓度呈现可靠的线性关系。

四、使用说明（实验流程概要）

1. 标准品制备：将提供的BSA蛋白标准品用配制液溶解为25 mg/mL母液，并进一步用与待测样品基质匹配的稀释液（如PBS）稀释至0.5 mg/mL的工作浓度。

2. 工作液配制：按50:1的体积比将BCA试剂A与试剂B混合，配制适量BCA工作液，充分混匀后室温保存，24小时内稳定。

3. 加样与孵育：在96孔板中分别加入系列浓度的蛋白标准品和待测样品，使每孔终体积为20 µL。随后每孔加入200 µL BCA工作液。

4. 显色反应：将反应板于37°C孵育20-30分钟，也可根据样品浓度选择室温延长孵育或60°C缩短孵育。

5. 吸光度检测：使用酶标仪在562 nm波长下测定各孔的吸光度值，540-595 nm范围亦可。

6. 浓度计算：根据标准品吸光度值绘制标准曲线，依据曲线方程计算待测样品的蛋白浓度。

五、注意事项

1. 干扰物质：样品中EDTA浓度需低于10 mM，避免使用EGTA，同时DTT应低于1 mM，β-巯基乙醇低于0.01%。

2. 仪器要求：推荐使用酶标仪与96孔板进行检测。若使用分光光度计，需按比例放大反应体系，并注意试剂消耗量会增加。

3. 标准曲线：为保证定量准确性，建议每次实验均配制新鲜标准品并制作标准曲线，以控制孵育时间与温度带来的变异。

4. 安全与用途：本产品仅供科研使用，操作时需穿戴适当的个人防护装备。不可用于临床诊断、食品或药品领域。

六、相关产品推荐

1. Bradford蛋白浓度测定试剂盒（货号：P0006）：采用考马斯亮蓝G-250法，快速测定蛋白浓度，适用于存在BCA法干扰物质（如较高浓度还原剂）的样品。

2. 增强型BCA蛋白浓度测定试剂盒（货号：P0010）：在经典BCA法基础上优化，具有更高的灵敏度和更宽的检测范围。