一、基本信息
产品名称:Zombie Aqua™ Fixable Viability Kit可固定活力染料试剂盒
产品货号:423101/423102
规格:100次检测,500次检测
保存温度:-20°C
二、产品介绍
Zombie Aqua™ 可固定活力染料试剂盒是一种基于胺反应性荧光染料的细胞活力检测工具。该染料具有膜通透性差异,可选择性标记膜完整性受损的细胞,从而在流式细胞术或免疫荧光显微分析中有效区分活细胞与死细胞。其水溶性及明亮的绿色荧光特性,使其适用于多色检测panel的构建。
三、产品应用
Zombie Aqua™ 可固定活力染料试剂盒主要用于哺乳动物细胞的活力状态分析,其具体应用包括:
△流式细胞术:用于多色流式细胞分析中的死活细胞鉴别。
△免疫细胞化学:用于免疫荧光显微技术中的细胞活力评估。
△细胞凋亡研究:辅助鉴定早期凋亡及晚期凋亡/坏死细胞群体。
△多参数分析:与其他细胞表面或细胞内标志物抗体联用,进行复杂的免疫表型分析。
四、产品优势
✅可固定性:染料与细胞蛋白共价结合,经固定和破膜处理后信号稳定,不影响后续胞内染色。
✅高亮度:染料具有极亮的绿色荧光,易于检测,并能有效区分弱阳性信号。
✅水溶性:极性水溶性染料,易于在缓冲体系中稀释和使用,减少非特异性沉淀。
✅兼容性:适用于多色实验方案,其荧光特性与多种流式细胞仪激光器和滤光片系统兼容。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 染料复溶:将试剂盒平衡至室温,向每管染料中加入100 µL DMSO,充分混匀至完全溶解。
2. 细胞准备:用不含Tris及蛋白质(如BSA、FBS)的PBS缓冲液洗涤细胞。
3. 染料孵育:将1-10 x 10^6个细胞重悬于优化后稀释度的染料工作液中,室温或4°C避光孵育15-30分钟。
4. 洗涤:使用含血清或BSA的细胞染色缓冲液洗涤细胞一次,以去除未结合染料。
5. 后续染色:可根据实验设计,继续进行细胞表面或胞内抗体的染色流程。
6. 固定(可选):染色后的细胞可用多聚甲醛等固定剂固定,以便于后续分析或保存。
六、注意事项
1. 缓冲液选择:避免使用Tris缓冲液稀释染料,且所用PBS不应含有外源蛋白质,以防干扰染料与细胞胺基的结合。
2. 染料滴定:建议针对不同的细胞类型和应用进行染料滴定,以确定最佳使用浓度,避免过度染色或染色不足。
3. 避光操作:整个染色孵育过程需避光进行,以防止荧光淬灭。
4. 复溶后保存:染料复溶后应立即使用,若需保存,应置于-20°C干燥避光环境(如干燥器),且保存期不宜超过一个月。
5. 多色panel设计:该染料最大发射峰为516 nm,与Brilliant Violet 510™等染料光谱相似,设计多色实验时需进行滤光片优化,避免光谱重叠。
七、相关产品推荐
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