一、基本信息

产品名称：BCA蛋白浓度测定试剂盒

产品货号：PC0020

规格：10T (100微孔) / 50T (500微孔) / 10*50T (500微孔)

保存温度：BCA试剂、Cu试剂及PBS稀释液室温保存；随盒提供的BSA蛋白标准品(5mg/mL)需于-20℃保存，有效期1年。

二、产品介绍

本试剂盒基于双缩脲反应的改良原理，用于准确测定溶液中蛋白质浓度。在碱性条件下，蛋白质将Cu²⁺还原为Cu⁺，后者与BCA试剂特异结合形成紫色络合物，该产物在562 nm处具有特征吸收峰。通过测定吸光度并与标准曲线比对，即可定量未知样品中的蛋白浓度。该方法对多种去垢剂具有良好耐受性，但受螯合剂、强还原剂及高浓度脂类物质干扰。

三、产品应用

本BCA蛋白浓度测定试剂盒适用于多种生物学样本的蛋白定量分析。

△蛋白样品定量：测定细胞裂解液、组织匀浆液、纯化蛋白溶液等样品的总蛋白浓度。

△酶动力学研究：为后续酶活性测定实验提供准确的蛋白浓度基准。

△Western Blot上样：准确定量蛋白样品，确保电泳上样量均一。

△蛋白质纯化监控：在蛋白质纯化各阶段监测蛋白浓度与回收率。

四、产品优势

✅灵敏度高：检测范围宽，在20-2000 µg/mL浓度区间内线性关系良好。

✅抗干扰性强：对样品中常见浓度的离子型（如SDS）与非离子型（如Triton X-100、Tween）去垢剂耐受性好。

✅操作简便：试剂配制步骤简单，孵育条件温和（37°C，15-30分钟），兼容微孔板与分光光度计两种检测模式。

✅稳定性佳：主要组分可室温保存，使用方便。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 工作液配制：按50:1的体积比将BCA试剂与Cu试剂混合，充分涡旋混匀，配制成BCA工作液。

2. 标准品稀释：使用提供的PBS稀释液将5 mg/mL BSA标准品稀释至0.5 mg/mL，作为最高浓度标准点，并进一步进行梯度稀释。

3. 加样与反应：向96孔板或离心管中分别加入标准品与待测样品，随后加入BCA工作液。

4. 孵育与检测：将反应体系于37°C避光孵育15-30分钟，随后使用酶标仪或分光光度计在562 nm波长下测定吸光度。

5. 浓度计算：以标准品浓度与吸光度值绘制标准曲线，依据曲线方程计算待测样品的蛋白浓度。

六、注意事项

1. 试剂保存：长期不使用时，建议将Cu试剂与PBS稀释液置于2-8℃保存。若BCA试剂因低温产生结晶，可于37℃温育使其完全溶解，不影响性能。

2. 干扰物质：样品中若含有高浓度EDTA、EGTA、DTT、β-巯基乙醇等螯合剂或还原剂，会严重干扰检测，建议换用Bradford法或其他兼容方法。

3. 样品背景：若样品稀释液或裂解液本身在562 nm处有较高背景吸收，需设置空白对照扣除，或考虑使用替代的蛋白定量方法。

4. 实验安全：操作时请穿戴实验服与一次性手套，遵守实验室安全规范。

七、相关产品推荐

1. BSA标准品(5mg/mL)（货号：PC0001）

2. BCA试剂（货号：PC0021）

3. Lowry法蛋白浓度测定试剂盒-1000微孔（货号：PC0030）

4. Bradford法蛋白浓度测定试剂盒（货号：PC0010）

5. 高效RIPA裂解液(组织/细胞)（货号：R0010）