一、基本信息

产品名称：CCK-8细胞增殖与毒性检测试剂盒

产品货号：CA1210

规格：100T/500T/1000T/10*500T/10*1000T

保存温度：2-8℃避光保存，有效期12个月

二、产品介绍

CCK-8试剂盒是一种基于水溶性四唑盐WST-8的细胞活性检测试剂盒，用于快速、灵敏地评估细胞增殖与毒性。其原理在于活细胞线粒体中的脱氢酶可将WST-8还原为水溶性的橙黄色甲臜产物，该产物的量与活细胞数量呈正相关。本产品为即用型溶液，操作简便，无需细胞洗涤步骤，可直接用于96孔板检测，适用于药物筛选、细胞因子研究和细胞毒性评估等多种实验场景。

三、产品应用

CCK-8试剂盒广泛应用于基于细胞活性的各类检测。

△细胞增殖检测：评估生长因子、激素或特定培养条件对细胞增殖的促进作用。

△细胞毒性检测：测定抗癌药物、化学试剂或环境毒素对细胞的杀伤作用。

△药物筛选：用于高通量筛选影响细胞活力或增殖的候选化合物。

△生长抑制分析：研究药物或基因干预对细胞生长速率的抑制效果。

四、产品优势

✅高灵敏度：WST-8法检测灵敏度高，所需细胞数量少，尤其适用于微量检测。

✅操作简便：试剂为即用型单组分溶液，无需预先配制，简化实验流程。

✅水溶性产物：反应生成的甲臜染料为水溶性，无需溶解步骤，减少误差。

✅兼容性好：适用于贴壁细胞和悬浮细胞，检测结果稳定可靠。

✅稳定性强：检测后加入适当酸或去垢剂可使显色在24小时内保持稳定。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 标准曲线制备：计数细胞并接种不同密度的细胞梯度，培养贴壁后加入CCK-8试剂孵育，测定吸光度值并绘制细胞数量-OD值标准曲线。

2. 细胞接种与处理：在96孔板中接种适量细胞悬液，于细胞培养箱中预培养使细胞贴壁或适应。

3. 加药处理：向实验孔中加入不同浓度的待测化合物溶液，继续培养特定时间。

4. CCK-8孵育：每孔加入CCK-8试剂，注意避免产生气泡，放回培养箱孵育1至4小时。

5. 吸光度测定：使用酶标仪在450 nm波长处测定各孔的吸光度值。

6. 数据分析：根据标准曲线计算细胞数量，或通过公式计算相对细胞活力百分比。

六、注意事项

1. 试剂保存：本品应避光保存于2-8℃，若试剂颜色由粉红变为黄色表明可能失效，应停止使用。

2. 孔板蒸发：长时间孵育时，96孔板边缘孔易因蒸发影响结果，建议边缘孔加缓冲液或不使用。

3. 干扰物质：检测体系中的还原性物质会干扰WST-8的还原反应，需在加CCK-8前更换新鲜培养基以去除。

4. 条件优化：对于新的细胞系，需预先优化细胞接种密度和CCK-8试剂孵育时间。

5. 细胞接种量：使用96孔板时，贴壁细胞建议至少1000个/孔，悬浮细胞如白细胞建议不低于2500个/孔。

6. 检测波长：推荐使用450 nm滤光片，若无，430-490 nm范围亦可，但450 nm灵敏度最佳。

7. 背景扣除：培养基中酚红的影响可通过设置空白对照孔（仅含培养基和CCK-8）扣除本底来消除。

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