Zymo Research的Quick-DNA™ Miniprep Plus Kit（货号D4068）是目前市面上操作最简便的通用型基因组DNA提取试剂盒之一，可从细胞、组织、全血及各类生物体液中提取高纯度总DNA。然而，该试剂盒的官方说明书为英文版本，不少国内用户在操作细节上存在疑惑。本文基于zymo试剂盒D4068说明书的官方内容，提供中文版解读，涵盖试剂盒组成、双缓冲液体系设计、两类样本的标准操作流程及关键注意事项，帮助研究者准确执行实验。

一、试剂盒核心组成与双缓冲液设计

D4068试剂盒包含50次制备量，核心组件包括：Zymo-Spin™ IIC-XLR离心柱（DNA结合容量25 μg/柱）、Proteinase K及储存缓冲液（20 mg，需加入1040 μL储存缓冲液复溶后-20℃保存）、BioFluid & Cell Buffer（红色，12 mL）、Solid Tissue Buffer（蓝色，6 mL）、Genomic Binding Buffer（25 mL）、DNA Pre-Wash Buffer（30 mL）、g-DNA Wash Buffer（50 mL）、DNA Elution Buffer（10 mL）以及收集管。

这套试剂盒最突出的设计是双颜色编码裂解缓冲液体系——红色缓冲液用于生物体液和培养细胞，蓝色缓冲液用于固体组织——通过颜色直观区分，避免误用缓冲液导致提取失败，这是Plus版相比普通Quick-DNA试剂盒的重要升级。其余缓冲液组分均可室温保存，仅Proteinase K复溶后需冻存。

二、生物体液与细胞操作流程

依据zymo试剂盒D4068说明书，生物体液（全血≤200 μL、唾液、精液等）和培养细胞（≤5×10⁶个）使用红色缓冲液流程：取≤200 μL样本，加入200 μL红色缓冲液和20 μL Proteinase K，混匀后55℃孵育10分钟；加入等体积Genomic Binding Buffer混匀；转移至IIC-XLR离心柱，≥12000×g离心1分钟；依次用400 μL DNA Pre-Wash Buffer、700 μL g-DNA Wash Buffer、200 μL g-DNA Wash Buffer洗涤；最后加入≥50 μL DNA Elution Buffer，静置5分钟后离心洗脱。全程约20分钟完成。

三、固体组织操作流程

固体组织（≤25 mg，如尾尖、耳廓、器官活检组织）使用蓝色缓冲液流程：取组织加入95 μL水、95 μL蓝色缓冲液和10 μL Proteinase K，混匀后55℃孵育1-3小时至组织完全溶解；离心去除不溶性碎屑后取上清，加入2倍体积Genomic Binding Buffer混匀；后续上柱、洗涤、洗脱步骤与体液流程一致。对于FFPE、毛发等特殊样本，说明书附有专项操作附录。

四、关键性能指标与注意事项

根据zymo试剂盒d4068快速说明书最新版（Ver. 1.3.0），D4068提取产物的DNA片段>50 kb，A260/A230≥2.0，纯度满足qPCR、NGS建库、甲基化分析等敏感下游应用。哺乳动物组织典型得率为1-5 μg DNA/mg组织，人全血3-7 μg DNA/100 μL。产物为RNA-free DNA，无需额外RNase A处理，可直接准确定量。洗脱体积最低35 μL即可获得高浓度产物。

操作中需特别注意：

1.血液样本提取前务必充分混匀，白细胞（基因组DNA主要来源）易快速沉降导致得量波动；

2.试剂盒不适用于已提取DNA的纯化回收，该需求应选用DNA Clean & Concentrator系列；

3.E. coli等易裂解细菌可直接使用红色缓冲液流程，但难裂解微生物需选用ZymoBIOMICS等专用试剂盒。

北京百奥创新科技有限公司作为Zymo Research中国区授权代理商，可提供ZYMO D4068及D4069（200次装）、D4068T（10次装）等全规格Quick-DNA Miniprep Plus试剂盒，并提供中文操作指导和技术支持，如有需求欢迎联系咨询。