抗体(antibody)是指机体由于抗原的刺激而产生的具有保护作用的蛋白质。能够特异性识别并结合抗原(如病原体、毒素或其他外来物质),在免疫防御中发挥关键作用。在Western Blot、ELISA、免疫组化(IHC)、免疫荧光(IF)等实验中,抗体用于检测特定蛋白的存在、定位和表达水平,同时也可用于观察目标分子在组织或细胞中的分布。
免疫组织化学IHC、免疫细胞化学ICC和免疫荧光IF是实验中经常用到的三种应用,由于三种应用比较相似,容易分不清,造成混乱。本文主要介绍免疫组化IHC、免疫细胞化学ICC和免疫荧光IF三种应用的区别。
1.免疫荧光(Immunofluorescence,IF)是一种利用荧光标记抗体检测特定抗原的技术,通过荧光显微镜观察,广泛应用于细胞生物学和病理学研究中。免疫荧光IF既可以用于细胞,也可以用于组织。
2.免疫细胞化学(Immunocytochemistry,ICC)是一种利用抗体特异性结合目标抗原,并通过化学显色或荧光标记在细胞水平上定位和检测特定蛋白质的技术。免疫细胞化学ICC的检测样本是细胞(培养细胞或细胞涂片)。
3.免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)是一种利用抗体特异性结合目标抗原,并通过化学显色或荧光标记在组织水平上定位和检测特定蛋白质的技术。免疫组织化学IHC的检测样本是组织切片(石蜡包埋或冷冻切片),因此IHC又可以分为IHC-P和IHC-Fr,IHC-P指的是石蜡组织切片的免疫组化,IHC-Fr指的是冰冻组织切片的免疫组化。
部分厂家通常用IHC代表组织的免疫荧光,ICC/IF代表细胞的免疫荧光,而有的则用IF统一表示细胞和组织的免疫荧光。不同厂家对这些简称的理解可能有所不同,在选择时注意根据具体产品说明书进行选择,以免选择错误导致实验失败。
百奥创新可提供abcam、R&D、CST、origene、艾碧维等多个品牌的抗体,有抗体需求欢迎联系百奥创新。